La enzima de restricción SacI Thermo Scientific reconoce los sitios GAGCT^C y corta mejor a una temperatura de 37 °C en su propio tampón exclusivo. Consulte Reaction Conditions for Restriction Enzymes (Condiciones de reacción para enzimas de restricción) para ver una tabla de actividad enzimática, condiciones para digestiones dobles e inactivación por calor para esta y otras enzimas de restricción. Nota: También disponible como enzima FastDigest para la digestión rápida del ADN. Isoesquizómeros: Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.

Las endonucleasas de restricción convencionales Thermo Scientific representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

Características

• Calidad superior: control de calidad riguroso y proceso de fabricación líder en el sector
• Cómodo sistema de cinco tampones codificados por colores
• Incluye tampón Tango universal para digestiones dobles
• BSA premezclada en tampones de reacción
• Amplia selección de especificidades de endonucleasas de restricción

Aplicaciones

• Clonación molecular
• Mapas de sitios de restricción
• Genotipificación
• Southern blotting
• Polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP)
• SNP

Nota: SacI es sensible a la metilación de la citosina en GAGmCTC pero no en GAGCTmC e insensible a la metilación de la adenina en GmAGCTC. AluI metiltransferasa (AGmCT) puede utilizarse para bloquear SacI. Los pásmidos súperhelicoidales pueden necesitar hasta 5 veces más Sacl para una digestión completa que el ADN lineal. SacI es inhibido por anticoagulantes clínicos comunes que se encuentran en algunas preparaciones de sangre periférica anticoagulada y de médula ósea. Se ha demostrado que los niveles de EDTA y ACD (ácido cítrico-citrato de sodio-glucosa) en la preparación de una muestra estándar inhiben la SacI. Se necesita tres veces la concentración normal de heparina para inhibir SacI. (J. E. Coad et al., Inhibition of restriction endonucleases by common clinical anticoagulants. Anal. Biochem. 205, 368-369, 1992).